鸡禽流感病毒抗体检测试剂盒

1 抗原预包被板条 1块 7 中止液 6ml

2 酶结合物 12ml 8 阴性对照 800μl

3 10倍浓缩洗刷液 50ml 9 阳性对照 800μl

4 底物A液 6ml 10 血清稀释 1块

5 底物B液 6ml 11 封板膜 2张

6 样本稀释液 50ml 12 说明书 1份

检测鸡血清中的禽流感病毒抗体，用于点评养鸡场鸡禽流感疫苗免疫状况及感染鸡的血清学辅佐确诊。

需自备的设备及试剂

微量移液器： 0.5μl～10μl、10μl～100μl、100μl～1000μl。 一次性移液器吸头。 量筒：500ml。 96孔板酶标仪。 蒸馏水或去离子水。 洗瓶或洗板机。

样品制备

取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。

洗刷液的准备

浓缩洗刷液运用前应恢复至室温，如有盐结晶，摇晃使结晶的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗刷液可在4℃存放一周左右。

样品的稀释

在血清稀释板中按1：101的体积比稀释待检血清（例如：200μl样品稀释液中加2μl待检血清）。

留心：阴性和阳性对照不用稀释。取每个样品后都要替换吸头， 记载每个样品在板上的方位。每个样品在参与到包被板微孔前应充分混匀。

操作过程

取预包被的检测板（根据样品*，可拆开分次运用），将稀释好的待检血清取100μl参与到检测板孔中。一同设阴性、阳性及空白对照各1孔，取阴性及阳性对照各100μl

分别参与反应孔中，空白对照仅参与100μl样本稀释液。悄然振匀孔中样品（勿溢出）。

盖上封板膜，置37℃温育30分钟。 留神揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，用洗刷液洗3次。每次用洗刷液注满板孔（约350μl），静置1分钟后甩掉。洗刷3次后在洁净吸水纸上拍干。 每孔加酶结合物100μl，盖上封板膜，置37℃温育30分钟。 留神揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗刷3次, 方法同2。紧记*在洁净吸水纸上拍干。 每孔先加底物A液50μl、再加底物B液50μl，混匀、盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。 每孔加中止液50μl，使反应中止，10分钟内测定效果。

效果判定

以空白对照调零用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度A值。试验树立的条件是阳性对照孔A450值大于或等于0.5，阴性对照孔A450值有必要小于0.2。假设试验无效，试验中的操作值得怀疑，试验应重做，并仔细检查各组分。

样品A450值大于0.25+阴性对照孔均值，判为阳性；样品A450值小于0.25+阴性对照孔均值，判为阴性；如阴性对照孔均值小于0.05按0.05核算。

有效期

贮存方法： 2 - 8oC下贮存。

有效期： 12个月。

禽流感（Bird Flu或Avian Influenza）是由禽流感病毒引起的一种急性传染病，也能感染人类，人感染后的症状首要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，大都伴有严峻的肺炎，严峻者心、肾等多种脏器衰竭导致去世，病死率很高，通常人感染禽流感去世率约为33%。此病可通过消化道、呼吸道、皮肤危害和眼结膜等多种途径传达，区域间的人员和车辆交游是传达本病的重要途径。