猪流感抗体检测试剂盒

检测原理

LSI 猪流感抗体检测试剂盒（CIVTEST SUIS Influenza）是运用直接ELISA 办法树立的。特异的猪流感病毒被包被在96 孔板上。在反响进程中，检测样本被参加反响孔中，样本中的特异性抗体会与孔中包被的特异性抗原反响，在洗板的进程中不会被清洗掉，当增加酶标复合物时，这些酶标复合物就会与猪的抗体发作反响。没有结合的酶标复合物在洗板的进程中被清洗。在参加对氧化酶灵敏的能够显色底物。显色的色彩深浅与样本所含猪流感病毒的抗体浓度成正比。

Kit Composition (enough for 460 test)

包被猪流感抗原的96 孔板. 5

Vial No0: 洗液(x10). 250 ml

Vial No1: 绿色的样本稀释液(x3) 100 ml

Vial No2:酶标复合物:赤色的符号HRPO 的单*抗猪LgG 抗体. 可直接运用30 ml

Vial No3: 底物: ABTS. 可直接运用。30 ml

Vial No4: 底物停止液: 稀草酸. 可直接运用. 30 ml

Vial No5: 阳性对照: 黄色的阳性血清. 可直接运用. 2.2 ml

Vial No6: 阴性对照: 蓝色的阴性血清. 可直接运用. 2.2 ml

掩盖膜5

说明书1

质检证书. 1

在试剂盒的液体中运用了硫柳*等防腐剂。

必需的但没供给的设备

37℃温箱准确移液器用于稀释的容器酶标仪灭菌或去离子水冲刷用具

用前预备：

仔细阅读说明书，一切试剂在2-8℃条件下保存。不用时，一切的板条一定要用用封口膜密封，并存放在封口的塑料小袋中，防止潮气对包被板的损害。虽然在生产进程中，包被的抗原现已被灭活，但包被的抗原仍被视为病毒的潜在来历。不要使底物触摸强光和氧化物。ABTS是一种灵敏度很高的底物，取出后，不得再加回瓶中，试剂瓶中已多备了25%的试剂，彻底够用。不要运用过期的成分或许不同批次试剂混合运用成分。留意加样和冲刷，以保证试验的准确度和准确度。不能用嘴吸液。操作进程中运用手套，停止液是一种有机酸，具有腐蚀性，运用时要当心。一切的废液要通过处理和净化。本品为兽用产品。

假如正保证存，没有打开的试剂，在到达标签指示的有效期时，也是很安稳的。

检测进程

试剂的预备：

一切的试剂在运用前，有必要回温到室温。

洗液（10X）：取1份清洗液参加9 份的灭菌水或去离子水中（如要配200ul的稀释液清洗液，可取20ul 的浓缩液参加180ul的灭菌水或去离子水）。配好的液体，咱们引荐在7 天内用完。

样本稀释液（3X）：制造时用1体积的样稀释液中参加2 倍体积德的蒸馏水或许去离子水。（例如制造60ml 的样本稀释液, 能够取20ml 样本稀释液, 再参加40ml 的蒸馏水或许去离子水）配好的液体，咱们引荐在2 天内用完。

留意：清洗液因为盐分高或许结晶，运用前有必要摇匀溶解。需求整瓶试剂，能够运用重复倒置混匀溶解。假如运用部分试剂，需求在室温或许在28-37℃水浴条件下10-15 分钟，将结晶溶解后，再配稀释液。为了防止构成结晶，清洗液可保存在到室温条件下。

B，样本的预备

阳性对照，阴性对照现已预备好,不用稀释, 样本需求用样本稀释液进行200倍稀释，假如运用多道加样器和96孔板进行稀释,引荐运用以下过程:先汲取5ml 的样本参加95ml 的样本稀释液中,混匀.再汲取5 ml 稀释了20 倍的液体参加ELISA 反响板孔,再参加45ml 的样本稀释液.

C．操作过程：

A，将试剂放在室温，并轻摇混匀

B，将样本和对照参加板孔中。阳性对照和阴性对照有必要是双份。

1，参加50ul 阳性和阴性对照，及200 倍稀释的样品在反响板孔.。

2, 盖上膜,在37℃效果60 分钟

3, 去膜,用300ul 的洗液洗3 遍,并在吸水纸大将平板弄干(倒置,在纸上轻敲),

4, 在每个孔中参加50ul 酶标抗体

5, 盖上膜在37℃反响60 分钟

6, 去掉膜,用洗液(300ul)洗3 次,弄干

7, 参加50ul 的底物,轻摇板2 秒

8，将平板放在黑私自在20-25℃效果15 分钟

9, 参加50ul 的停止液,轻敲平板混匀

10,用柔软的东西轻拭平板上的脏物,在405nm 下读数并记载成果

读数

A. 试验建立条件：

阳性对照OD450 > 0.7，并且阳性对照平均值/阴性对照平均值> 5.5.

B. 成果的解说

成果用IRPC 表明,. 以下是计算公式