蛋白含量检测试剂盒(BCA法)
原理
在碱性环境下蛋白质分子中多肽键结构与Cu2+络合并将Cu+,Cu+特异性结合成稳定的紫色复合物,该复合物在)
试剂B 30ml (4℃保存)
仪器
酶标仪或分光光度计,工作波长540nm~590nm,*工作波长490nm波长。
适用范围
不含还原剂的蛋白样品。
实验步骤
B按2. 标准品稀释:用纯化水将2mg/ml的1600、400、100、25ug/ml。注意用纯化水标记空白。
30分钟或室温下静置4. 在酶标仪或分光光度计上,以562nm波长下,空白管调OD值。
Y轴,标准品浓度为6. 从标准曲线上查找待测样品浓度,注意稀释后的样品所测浓度需乘以稀释倍数。
说明
20-2000ug/ml,若样本超过此范围需再酌情稀释。
10mM时不可直接使用3. 在37℃孵育2小时对检测比较便利,但严格来讲,此时反应尚未达到终点,通常每A562下2.3%,在4. 可测量吸附于固相支持物如酶标版、琼脂糖、亲和层析凝胶上的蛋白。
<span font-size:19px;"="">5. 本法仅适用于科研。